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一、产品描述
慢反应探针（Slow-response probes），包括阳离子羰花青、罗丹明和阴离子氧鎓醇（Oxonols），都用来检测不可兴奋细胞因呼吸活性、离子通道渗透和其他因素引起的平均膜电位变化。
DiBAC4(3) (Bis-(1,3-Dibutylbarbituric Acid)Trimethine Oxonol)，是一种慢反应的膜电位敏感探针，随着膜电位变化在细胞膜内进行重新分配。当染料由于膜的去极化进入细胞膜，荧光增强且往红色光谱迁移。
DiBAC4(3)对膜电位变化的荧光反应速率通常比苯乙烯染料（比如Di-4- ANEPPS）慢，但荧光信号变化较大（通常~1% fluorescence change/mV）。
DiBAC染料由于总负电荷被线粒体所排斥，使其在质膜电位测定上相较于羰花青染料表现较好。
DiBAC4(3)可用于流式实验中监测防御素的活性。
二、物理参数
【英文名称】：Bis(1,3-dibutylbarbituric acid) trimethine oxono（简称：DiBAC4(3））
【中文名称】：双(1,3-二巴比妥酸)-三次甲基氧烯洛尔
【CAS NO】：70363-83-6
【分子式】：C27H40N4O6
【分子量】：516.64 g/mol
【熔点】：>200℃
【沸点】：614.3±65.0 °C
【密度】：1.201±0.06 g/cm3
【酸度系数(pKa)】：4.80±0.20
【形态】：橙色固体
【Ex/Em】：493/516 nm
【溶解性】：溶于DMSO、DMF
【纯度】：≥95%
【储存条件】：-20℃避光干燥
【化学结构式】：
三、生物活性
体外研究
用DiBAC4(3)清楚地观察到HEKBKα中10μM伊文思蓝(EB)诱导的膜超极化,而加入3mM四乙基氯化铵(TEA)的膜电位(MP)变化比用微电极测量的慢。通过微电极和DiBAC4(3)的测量,超极化峰值的时间分别为2.3±0.9 s(n = 4)和35.0±2.6 s(n = 12,P <0.01)。
细胞实验
在荧光测量之前，将细胞在含有100nM DiBAC4（3）的KRH（Krebs-Ringer-HEPES）缓冲液中在室温下孵育20分钟。染色的细胞无需洗涤即可用于实验。使用505nm双色镜和BA滤光器（> 520nm）收集荧光发射。
四、注意事项
实验调整：需根据细胞类型调整染料浓度和孵育时间，以减少对细胞的影响；
干扰因素：部分化合物可能干扰检测，实验时可选用缓冲液替代培养基。
安全避光：荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光；操作时请穿实验服并戴一次性手套。